【作者】刘玉焕 钟英长
【机构】中山大学生命科学学院生物化学系;
【摘要】黑曲霉AspergillusnigerY-8在液体培养基中30℃培养5d,其菌体用超声波破碎后,经硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素层析、Sephadex-100凝胶过滤,得到凝胶电泳均一的对硫磷降解酶,其比活为6.94,提纯倍数为13.6倍,收率为17.4%。酶作用的最适温度是50℃,最适pH为7.5,在40℃以下和pH6.0~9.0之间稳定,此酶为单亚基蛋白,凝胶过滤法测得分子量为42000,含糖14.6%,SDS、Hg2+、Ag+、Fe3+对酶有强烈的抑制作用,金属螫合剂EDTA对酶活无影响。此酶对甲基对硫磷、敌敌畏、亚胺硫磷也有较好的降解作用,当以对硫磷为底物时,Km为0.43mmol/L,Vmax为1.24μmol·mg-1·min-1。
【关键词】黑曲霉; 对硫磷降解酶; 纯化;