何丽鸿; 于荣利; 陈明杰; 潘迎捷
中华人民共和国农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室; 上海市食用菌工程技术研究中心; 上海市农业遗传育种重点实验室; 上海市农业科学院食用菌研究所; 南京农业大学生命科学院微生物系; 上海海洋大学
【中文摘要】 采用化学裂解和酶解相结合的方法,以加入PVPP的高盐缓冲液作为细胞裂解反应体系,用PEG- 8000进行DNA沉淀.从双孢蘑菇堆肥后发酵的4个代表时期培养料样品中提取微生物总DNA,再以总DNA为模板,以专用引物F27和R1498进行PCR扩增,获得16S rDNA片段,经纯化后构建4个时期样品的细菌16S rDNA文库。试验结果表明,本试验获得的总DNA质量较好。采用PCR扩增可获得多个细菌、放线菌和真菌特异片段;细菌16S rDNA文库的目的片段插入效率在90%以上。
【中文关键词】 双孢蘑菇; 培养料后发酵; 细菌16S rDNA文库
【基金】农业部公益性行业科研专项项目“食用菌菌种质量评价与菌种信息系统研究与建立”(编号：nyhyzx07-008)的部分研究内容
【文献出处】 食用菌学报,Acta Edulis Fungi,编辑部邮箱,2008年04期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2008-04-005