【作者】吴清平；周小燕；钟瑜；陈素云；
【机构】广东省微生物研究所；广东省微生物研究所 广州 510070；
【摘要】从73个尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)不同专化型菌株上获得684个硝酸盐营养突变株(nit mutant)。作相关氮源利用试验及亚硝酸反应后,鉴定出一新硝酸盐营养突变类型:亚硝酸盐还原酶结构基因类型,命名为nit8,占总突变株的6.7%。同时被鉴别的还有nit1、nit3和Nit M三种突变类型,它们分别占突变株总数的81.0%,3.8%和8.5%。此外,首次引入一种亚硝酸反应在这类研究中的应用,还提出了互补指数概念与公式来表示nit突变株营养体之间亲和的能力。通过广泛收集和分离,获得根霉属（Rhizopus）、曲霉属（Aspergillus）及裂褶菌属（Schizophyllum）等属菌株897株。产酸指示平板上的变色圈测定结果表明,它们中间628株为产酸菌。通过纸层析对产酸菌发酵液酸谱的分析,获得129株L-苹果酸产生菌,经进一步测定发酵液中L-苹果酸的含量,筛选出以葡萄糖为原料,摇瓶发酵140小时,L-苹果酸产率48.37g/L,对糖转化率48.37×10-2的菌株LM02。经初步鉴定,这一菌株为曲霉（Asper-gillus sp.）以LM02作为出发株,采用亚硝基胍、自然污染细菌、甲基磺酸乙酯及紫外线进行诱变处理,选育出葡萄糖为原料,L-苹果酸产率较高的突变株N1-14、N1-14′、NE1412、NU1416及NU1419。其中N1-14′的L-苹果酸产量最高,比出发株提高46.2×10-2。N1-14′的菌丝生长速度快,产孢能力强,摇瓶发酵葡萄糖140小时,平均L-苹果酸产率为72.53g/L,对糖转化率53.74×10-2。全发酵液经薄层层析测定,不含黄曲霉毒素。发酵产物分离提纯后,得到白色粉末状结晶,经纸层析、质谱及红外光谱测定,证明为L-苹果酸。
【关键词】L-苹果酸产生菌；曲霉；筛选；诱变；鉴定；
【基金】广东省八五攻关项目；