【作者】杨星勇 王中康 夏玉先 卢晓风 裴炎
【机构】西南农业大学生物技术中心；
【摘要】以几丁质为底物，加入基本盐培养基中，诱导球孢白僵菌（Beauveriabassiana）产生分解昆虫表皮的蛋白酶。诱导物中，蝉蜕诱导的蛋白酶总活性、比活较高，经超滤、离子交换层析、亲和层析、制备性IEF电洗脱纯化了一种有凝乳弹性蛋白酶（Pr1）活性的蛋白酶BbPr1。经SDS－PAGE电泳银染后是单带，HPLC凝胶过滤显示单峰。BbPr1为单体酶，分子量为33.6kD左右，pI为7.4。底物专一性测定显示，BbPr1能水解Phe或Leu形成的酸胺键和肽键。BbPrl可被PMSF抑制，表明其活性中心有Ser残基；BbPr1还可被胰凝乳蛋白酶抑制剂TPCK和凝乳弹性蛋白酶抑制剂TEI等所抑制;胰蛋白酶抑制剂beupeptin和Epianstatin，及胃蛋白酶抑制剂Pepstain对BbPr1活性无影响。还研究了BbPr1的最适作用pH和pH稳定性。
【基金】国家自然科学基金；
【关键词】球胞白僵菌; 昆虫病原真菌; 凝乳弹性蛋白酶; 纯化; 特性;