【作者】陈福生 周启 罗信昌 李书谦 王爱华 路磊
【机构】上教育部农业微生物重点实验室 农业部食品安全评价重点开放实验室 华中农业大学 教育部农业微生物重点实验室 农业部食品安全评价重点开放实验室 华中农业大学 农业部食品质量监督检验测试中心华中农业大学 农业部食品质量监督检验测试中心 华中农业大学 农业部食品质量监督检验测试中心 华中农业大学 武汉430070,武汉430070,武汉430070,武汉430064,武汉430064,武汉430064
【摘要】以黄曲霉毒素B1(AFB1)与牛血清蛋白(BSA)的连接物AFB1-BSA注射免疫兔子获得抗AFB1抗血清,经(NH4)2SO4沉淀、酶切处理与亲和层析分离纯化后,得到抗AFB1独特型抗体Ab1及其酶切片段Fab1,然后再将Fab1注射免疫BALB/c小鼠,得到抗(抗AFB1)独特型抗体Ab2及其酶切Fab2。研究了Ab2和Fab2的性质,结果表明,Ab2和其Fab2都仅与Ab1及其Fab1反应,而不和抗桔霉素等其他抗体反应,有较好的特异性。以AFB1与卵清蛋白(OV)的连接物AFB1-OV为包被抗原,Fab1为反应抗体,Ab2和Fab2为竞争抗原,达到50%的竞争抑制率时,Ab2和Fab2的浓度分别为3.98ug/ml和1.12ug/ml;而以Ab2和Fab2为包被抗原,Fab1为反应抗体,AFB1为竞争抗原,达到50%的竞争抑制率时,AFB1的浓度分别为44.67ug/L和6.31ug/L,这表明无论是Ab2还是Fab2都和AFB1有很好的内影像关系,可以作为AFB1的替代品用于AFB1的免疫学检测。但是相对而言,由于Fab2的分子量小,反应时的空间位阻小,所以Fab2更适合于用作AFB1的替代品。
【基金】湖北省科技厅重点课题(992p0321)； 教育部农业微生物重点实验室开放课题(AML99023)；
【关键词】黄曲霉毒素B1-牛血清蛋白（AFB1-BSA）连接物; 抗原; 亲和层析;