黄年来
(福建三明真菌研究所)
香菇Lentinusedodes(Berk)Sing.是目前世界上第二大宗人工栽培的食用菌。1981年全世界鲜香菇的年产量约19.2万吨(鲜：干=7:1；其中日本干香菇占1，4735吨，占世界干香菇产量90(共l6385吨，其中中国700吨，南朝鲜950吨；鲜菇7，8000吨，几乎占全世界量的100)。随着科枝交流和亚洲移民的增多。目前欧洲和羡国香菇的需求量激增。对香菇的引种也十分兴趣。
我国虽然有800年以上栽培香菇的历史，但至今没有把香菇生产搞上去。近几年来的年产量徘徊在3000一4000吨左右。其原因是多方面的。其中有一个主要原因是沿用砍花栽培法，对香菇育种工作没有引起国家的高度重视。
目前国内栽培的许多香菇菌种，除了各地自己分离和保藏的野生菌株之外，大多数是从日本引进来的栽培种。只有少数有条件的高等院校和研究所，做了少量的探索工作。为了把我国的香菇栽培事业搞上去，为了育出本国的香菇优良品种，育菇育种工作亟待开展。
大家都知道，育种是一种用人工方法控制香菇繁殖的手段，通过育种的手段，把不同菌株理想的遗传特征结合起来，创造比原来更好的菌株，甚至是自然界申原来不存在的新种。新品种或新菌株。为了达到这个目的，在从事食用育种过程中，必须具备如下最低的要求:
1.在交配过程中，菌株之间有明显可辩的交配反应。
2.交配之后，杂交菌株有产生子实体的能力。
3.有减数分梨(亲株双方的遗传物质可以发生交换、重组和分离)。
4.担孢子有存活力。
除上述四条之外，为了提高育种的工作效率，还必须具备许多其他的附加条件。
据国外报道，选作育种对象的，最理想的食用菌的特征如下:
1.有性生殖是异宗结合的；
2.生活史比较短，单倍期占优势；
3.生活史可以在实验室中，在入工控制的条件下完成；
4.孢子很容易萌发，而且萌发率很高；
5.交配反应很清楚，结实性菌丝很容易辨认，并把它分离出来进行扩大，培养，产生子实体；
6.培养条件已清楚，要求又比较简单；
7.育种原始材料很容易在自然界中找到；
8.遗传特性有较大的变异性。
从1935年日本及川、西门，内山等人开始研究香菇的性别，直到目前大规模的育种工作，充分证明，把香菇作为育种素材是接近理想的。唯一的一个缺点是香菇结菇试验的时间比较长，需要好几个月的肘间。不过，随着食用菌生理学的进展，这一难点又有了新的突破。
总之，目前我国开展香菇育种研究已有了较完整的理论基础，一定能把工作开展起来。
二、香菇育种的基础知识
香菇的生活史及有性生殖(表1）。
香菇的育种离不开性和交配型，不了解香菇的性和交配型，不了解育种计划是不行的。人们传统的方法是选种或筛选。筛选是一种简便的方法，但筛选只能在有限的范围内进行，目前真正有效的育种方法是杂交。
香菇的有性生殖(Sexuality)是双因子控制的，异宗结合的。经过详细的细胞学研究己经查明，凡能形成子实体的菌丝都是有锁状联合的双核菌丝，同时观察到担子中发生减数分裂，以及其后在担子上形成四个单核的担抱子。香菇担抱子萌发并不产生典型的芽管。而是沿长轴方向伸长，形成单核菌丝。所有的单核菌丝都没有锁状联合，自交不孕，杂交可孕。
通过单核菌丝之间的交配实验，分析了单核菌丝交配过程中产生有锁状联合的菌丝的范围，并测定在形成双核菌丝中细胞核迁移的速度，证明香菇是双因子控制的异宗结合的食用菌。即孢子有四种交配型，即四极性。有两个不亲和因子A和B控制着有性生殖的过程。即在香菇的生活史中，A因子相B因子控制着不同的，但又互相关系的部分。A因子控制着细胞核的配对和锁状联合的形成，B因子控制着细胞核的迁移和锁状细胞的融合。A因子和B因子都有复等位基因的性质。
当A因子的等位基因不同，而B因子的等位基因相同时(A≠B＝)这种交配属于半亲和性。其特点是细胞核没有迁移，只局限于双万接触区进行交配，形成一种不会出菇的异核菌丝。在这种异核菌丝中，顶端细胞是单核的，次顶端细胞是单核的，有一个假锁状联合(锁状细胞相次顶端细胞发生融合)。
当A因子的等位基因相同，而B因子的等位基因不同时(A=B≠)，这种交配类型也属于半亲和性。其特点是细胞核发生迁移，细胞形成一种不会出菇的异核菌丝，这种异菌核丝有多核的细胞，每个细胞中有数目不定的细胞核,有部分横隔膜，没有锁状联合。
当A因子的等位基因相同，B因子的等位基因也相同(A=B=)，没有交配，形成A=B=的异核菌丝，这种异核菌丝在形态上和其他异核菌丝是有区别的，它的气生菌丝很弱，生长不正常，常平贴于培养基上，故称为平贴"Flat"菌丝。
当A因子等位基因不同，B因子等位基因也不同时(A≠B≠),其交配型是完全可亲和的。其特点是有细胞核的迁移，结果在交配的双方全面形成有出菇能力的、有锁状联合的双核菌丝。香菇育种主要的重点和目的是获得优质的A≠B≠的双核菌丝。
总而言之，香菇是典型的双因子控制的异宗结合的食用菌。其交配反应如表2所示.
甲、取同一朵香菇同一担子上四个担孢子进行杂交，完全亲和的交配只有25。
乙、取同一朵香菇不同担子上的孢子进行所谓多孢杂交，除了产生完全亲和的交配之外，也可能产生半亲和的交配，结实的双核菌丝和不结实的多核异核菌丝混在一起。结菇能力差。故香菇杂交育种必须采用孢子分离，用单核菌丝进行交配。同一朵香菇，或同一品种香菇，遗传物质相似，杂交后生活力不会有很大的改变，在育种中可以不用。
丙、从不同品系的香菇中取担孢子或单核菌丝进行交配，结果绝大多数的单核菌丝能互相交配，产生锁状联合。这意味着不同品系的单核菌丝其不亲和性因子A和B的等位基因都有不同。
日本每年都到巴布亚新几内亚、婆罗门洲、泥泊尔采集野生香菇和日本香菇杂交，这就是日本能育出许多香菇新品种的原因。
我国野生香菇的资源相当丰富，南方十一个省市有许多优良的地方品种，是我们培育香菇优良品种的基因宝库。同时我们也可以采用日本的方法。采用中国野生品种×中国栽培品种；中国野生品种×引进的日本菌种。这样做，亲株遗传性状有较大差异，可以育出好种；而不要采用日本菌种×日本菌种，或同一中国品种×同一中国品种，因为它们的亲株遗传物质相近。杂交后代没有多大差异。
三、杂交育种的步骤
1．出发菌株的选择
供杂交用的亲本，必须按育种的目的认真地进行挑选，必须是目前生产上比较好的，或具有某种特殊性状的菌株。
2．分离单个担抱子或单核菌丝
有条件的单位采用显微操作器分离尽可能多的单抱子或单核菌丝。基层单位可以采用连续稀释法。在琼脂平板上挑取单个(极微小的)菌落，并在移植后，镜检。在排除其他菌类污染的情况下，把没有形成锁状连合的单核菌丝，挑选出来，每管眺一个菌株。如果进行遗传研究，还需要通过交配反应，确定每一菌株的不亲和性因子，即极性。如果生产性育种可以不做这一工作。
3．不同亲本(地方品种)单核菌丝的杂交
把不同亲本接在不同试管中，把需要杂交的两亲本，接在同一试管的斜面上，把能产生真锁状连合的双核菌丝挑出来。按此类推可以获得许许多多杂交的菌株。供进一步的出菇试验。
注，搞香菇杂交研究，常用的培养基如下，
①马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)
马铃薯(去皮)200一250克
葡萄糖20克
琼脂15―20克
水1000毫升
②酵母蔗糖琼脂培养基(ESA)
蔗糖20克
酵母粉5克
琼脂15克
水1000毫升
灭菌前pH调至5.2
③完全培养基(CM)
蛋白胨2克
葡萄糖20克
磷酸二氢钾0.46克
磷酸氢二钾1克
硫酸镁0.5克
琼脂15克
蒸馏水1000毫升
上述培养基在2.5大气压,120℃下,灭菌30分钟，冷却备用。
前面已经讲过了，香菇育种工作的最大难题是出菇周期长。近几年来美国的吴龙溪、Stahmann,Grav,F.Leatham(1979,1983)在日本人的基础上。研究了香菇的生理学，找出一种能三形成香菇子实体的，化学成分固定的培养基。利用这种培养基，接上香菇菌种，在22土1℃，相对湿度80，有光照的培养箱申，培养45天后，有90以上的培养瓶长出香菇原基，有20以上的培养瓶，香菇能成熟开伞，弹射白色的孢子。这个培养基对香菇育种是有用的。现介绍如下:(培养基的最后浓度)：D一葡萄糖26克，L一谷氨酸0.25克，D一葡萄糖醛酸4克，磷酸二氢钾2克，七水合硫酸镁2克；矿质元素溶液10毫升。注①微量元素溶液1毫升；注②维生素溶液1毫升，注③水杨酸溶液0.1毫升。
注④：(1)矿质元素溶液的组成(克/升)：氯化钙3.67，硫峻锰4.39；硫酸锌2.20。
(2)微量元素溶液组成(/升):硫酸铁铵14.1克，硫酸铜784毫克；氯化钴81毫克，钼酸钠51毫克，氯化镍81毫克，氯化锡38毫克，浓盐酸2毫升。
(3)维生素溶液(毫克/升):肌醇1O0Q，盐酸硫胺素1000，盐酸毗哆醇100，烟酸100，泛酸钠100，对氨基苯甲酸100，核黄素100，生物素30；叶酸l0，钴维生素(B12)10。
(4)水杨酸溶液：95乙醇1升(V/V)，水杨酸10克。
附：1.分离到单核菌丝之后，应立刻进行交配实验，防止长期冷藏后，香菇原生质发生变性，影响到细胞核的迁移，致使单核菌丝丧失原有的交配能力。
2.交配后的菌株可以进行木屑栽培，也可以进行段木栽培，以确定杂交菌株的优劣。
四、杂交菌株实用价值的鉴定
把杂交得到的双核菌丝，制成菌种，进行木屑和段木栽培。观察菌种酱色液体分泌的早晚，多少；菌被形成与否。子实体原基出现的早晚，多少，子实体发生的季节，形状，大小，厚度…进行考种。
1.杂交菌株子实体发生型的鉴定
在确定杂交香菇发生型时。首光必须找出该菌株子实体形成的必须的温度范围及中心温度。发生季节应以原基形成和生长的温度为准，来进行确定。
低温性品系5一15℃
中温性品系10一20℃.
高温性品系20一25℃
若中心温度不足10℃的算为低温品系，春生型中心温度10一20℃的算为中温品系，春秋发生型。中心温度20C以上的算高温性品性，夏生型或夏秋生型。
2.香菇其他特征的鉴定
香菇有许多品种，每一个品种都有自己的生理特征和形态特征。
所谓生理特征是指香菇菌丝的生长与温度、湿度、光线、pH值等的关系，以及对木材的腐朽力等。生理上的差别是非常微妙的，肉眼不易看出。要通过某些生理实验才能知道。但是，生态特征，例如:子实体的形状，发生期的区别是很明显的。所以在得到杂交菌株之后，除了摸清其发生型之外，还要对子实体的形状进行鉴定。香菇子实体的形态，会随着生育时环境条件的变化而变化。子实体的特征可举，菌盖的形状、色泽、大小，菌肉的厚度，鳞片的形状，色泽，附着方式；菌柄的形状，长度，粗度等，其中最重要的特征是菌盖的大小和厚薄。
香菇的大小和厚薄尚没有统一的规格，一般标准是大叶种(直径6一8厘米)，中叶种(直径4一6厘米)，小叶种(直径3一4厘米)。菌肉按厚度可分为厚肉种，中肉种，薄肉种。把以上形态特征综合起来，再加上整朵香菇美丽的程度，作为核品种的特征。
从孢子分离到子实体的鉴定，初步选出有希望的菌株，在实际栽培中。考察其产量和质量，进一步确定其使用价值。总之，杂交育种是一项细微，花时间，花劳力，花成本的工作，但又是目前比较有效的一项工作。
参考文献略
原文发表于《真菌试验》（三明真菌研究所），1985(12)：82-86。
