国内关于羊肚菌人工驯化栽培的最早记录是1983年（顾云龙 1983）。
在1883年《中国食用菌》杂志的第二期上，顾云龙发表了其对黑脉羊肚菌的引种驯化研究。
顾龙云（1983）对甘南、临潭、洮河林区的野生羊肚菌调研发现，黑脉羊肚菌（M.angusticeps）子实体在云、冷杉林山谷伐木滑道下生长得最多，其中有的菌丝休在枯枝落叶层下腐殖质中的腐木上生长发育，当温、湿度适宜时便形成子实体。
作者随后对其进行了孢子分离和栽培实验，其中孢子分离方法为悬挂孢子弹射法（图1~2 所示）。具体做法是：将羊肚菌子实休切弃带泥的菌柄基部，用无菌水冲洗数次后置无菌箱内的无菌烧杯中。接下来的操作均以无菌操作规范进行：首先用75%的酒精棉球对羊肚菌子实体进行表面消毒，用铁丝弯钩挂住菌柄基部，将子实体倒挂在三角瓶中，使羊肚菌菌盖的最低端距瓶底培养基表面2 ~ 3 cm，塞上棉塞，置于16 ~ 18℃，并用 40 W日光灯照射，24 h左右，即可见到像一阵烟雾似的子囊孢子散落在培养基上（注：即便看不到弹射的孢子也没关系）。随后，在无菌条件下丢弃子实体，将三角瓶置于20℃恒温培养，待孢子萌发形成菌落后进行纯化、转管操作，并镜检获得的羊肚菌纯菌种。
图1悬挂法进行孢子弹射分离（顾龙云1983）
顾龙云（1983）所进行的孢子萌发和转管所用的培养基分两种，其中1号培养基为：腐殖质土浸出液300 mL（菇木周围的土200 g加水500 mL煮沸过滤）、菇木浸出掖液100 mL（菇木50 g、加水300 mL煮沸过滤）、子实体浸出液100 mL（子实体25 g、加水300 mL煮沸过滤）、葡萄糖5 g、磷酸二氢钾0.5 g、硫酸镁0.5 g、尿素0.5 g、石膏粉1 g、琼脂10 g，加水至500 mL；2号培养基以1号培养基中不添加子实体浸出液，其他成分相同；培养基pH 7.2 ~ 7.5之间，灭菌后备用。作者指出，20℃培育，1号培养基菌丝生长较快，菌丝整体整齐、浓密、粗壮，7 ~ 10 d可长满斜面，2号培养基生长较慢，菌丝参差不齐、稀疏、细弱，10 ~ 14 d长满斜面。
顾云龙所进行的栽培实验以栎木屑75%、麸皮15%、腐殖质土5%、过磷酸钙0.4%、葡萄糖1%、硫酸铵0.5%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸镁0.05%、尿素1%、石膏粉1%为主，并以添加或不添加1%的羊肚菌子实体碎粉作为可选项进行装瓶、灭菌，接种、养菌完成后，进行催菇处理（保持空气湿度80% ~ 85%，散射光照射）。最终发现，在添加有1%子实体碎粉的培养基上，16 ~ 20℃条件下，35 d可长满全瓶，55 d出现珊瑚型绿豆大的子实体原基，继续培养至65 d，原基不再进一步分化，在未添加羊肚菌子实体碎粉的固体培养基上，菌丝生长慢，45 d仅生长到全瓶的1 / 2 , 继续培养至65 d，未形成原基。
虽然作者（顾龙云1983）指出，55 d的培育获得珊瑚型绿豆大的羊肚菌子实体原基，但最终未能获得成熟的羊肚菌子实体。从全文来看，虽然作者也对获得菌丝物进行镜检，指出菌丝有分隔，无锁状联合，但作者并未记录菌丝的颜色变化、菌核等羊肚菌的其他典型特征，加之20℃的试管种和瓶栽培养时间均明显长于正常的羊肚菌生长速度（编者注：PDA或CYM培养基，20 ~ 23℃培育，180×18 mm试管，平均4 ~ 6 d即可长满，6 ~ 9 d可形成菌核；750 mL原种瓶，20 ~ 23℃培育，20 ~ 25 d即可完全长满）；且从培养基组成来看，作者使用的培养基营养均比较丰富，这不是菌丝生长缓慢的原因所在，因此，这里我们无法对作者获得的羊肚菌菌种纯度进行判别。作者进行的瓶栽实验思路和常规的食用菌如金针菇、杏鲍菇等瓶栽相似，属于早期的仿生栽培理念。虽然作者指出获得珊瑚状原基，但缺乏对其获得的原基的详细描述，也无法判定，其是否为真正的羊肚菌原基。（未完待续）
刘伟授权易菇网独家刊载，未经许可，禁止转载。
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