1. 母种制备技术 从食用菌的孢子或子实体组织分离培养出来的第一次纯菌丝体，称为母种或者是一级菌种。由于第一次分离出的母种数量少，不能满足生产的需要，进一步扩大培养后才能大 批量的生产。
（1）使用的材料和器皿
原料：马铃薯、葡萄糖或白糖、琼脂。
器皿：台秤、烧杯、量简、小锅、漏斗、试管。
材料：牛角匙、小刀、绳、棉花、纱布、纸。
（2）配制方法和步骤
马铃薯、葡萄糖、琼脂、培养基的配方： 将马铃薯洗净，去皮，如有芽眼去掉，称取200克。切成花生豆大小的块，量取1000毫 升水，倒入小锅中，把切好的马铃薯块一并倒入。开锅后记时，维持20－3 0分钟，加热完 后用三层纱布过滤，去渣，得到马铃薯汁，如果马铃薯汁不足 1000毫升，补水1000毫升， 而后再倒入铝锅中，加人称量好的琼脂20克，加热溶化，然后加葡萄糖25克溶解，即得到 培养基。培养基做好后即可分装试管，用棉塞塞入试管的深度1寸左右 为宜。把培养基倒人漏斗内分装试管，每支装量1寸左右，分装完毕后每5－6支一组，用双层报纸捆成捆，将捆成捆的培养基放进灭菌锅内灭菌，然后在试管上盖上报纸，将灭菌锅冷凝管插入内筒小孔内，将螺母对称扣紧，加热灭菌30分钟，最后晾斜面，凝固后备用。
接种和培养： 接种室和接种箱在使用前进行清洁消毒，一般用紫外线灯照射半小时，或用甲醛加5克高锰酸钾密闭熏蒸4个小时。接种前，接种人员要用酒精擦拭双手，试管及一切接种设备，进行表面消毒，试管上贴上标签，注明菌种名称，接种日期和接种人姓名。
接种时，选择菌丝健壮，生长旺盛，无老化，没有感染杂菌的母种试管，在消过毒的无菌室或接种箱内，按无菌操作要求进行操作，接种铲用酒精消毒，再在酒精灯火焰上灼烧灭菌，将接种铲放在接种试管内冷却，迅速转移到母管内，将菌丝及培养基挑起绿豆大小一块快速移入另一支斜面培养基中央定植。迅速将接种铲拿出，在酒精灯火焰旁塞紧棉塞儿，然后将试管捆成捆，放入恒温箱内培养。在25℃条件下培养7天，菌丝就可以长满试管。制作原料要避光，防潮、防杂菌感染。每支母管可扩大20－80支新管。
