分装培养基高压灭菌一级菌种扩管
在食用菌生产中，母种的培养是至关重要的一环。母种质量的优劣，直接影响到食用菌产量的高低和栽培的成败。
制作培养基
先将新鲜无病害的马铃薯洗净，去皮后切成小薄片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁。然后在马铃薯煮汁中加琼脂20克和蔗糖20克煮溶，后补足水至1000毫升，调节pH值在5.5～6。调好pH值后进行分装，一般将培养基装至试管的1/4处，而后加盖棉塞，再用牛皮纸将试管每10支捆成一捆。分装时，注意培养基不可沾在近试管口的壁上，以免日后生霉菌。分装后要立即进行高压灭菌，不可过夜。
高压灭菌
将用牛皮纸捆好的试管 （棉塞朝上）竖直放入高压锅内进行灭菌。在0.11兆帕压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。灭菌时，放汽要充分，否则影响灭菌效果。开锅取出试管后趁热摆放，使培养基成斜面。试管的斜面以距棉塞3厘米为宜，斜面摆成后，不宜再摆动。
一级菌种扩管
扩管要在无菌条件下进行，先将扩管工具、培养基及菌种放到扩管箱内，然后按每立方米用高锰酸钾5克、40%的甲醛溶液10毫升的量进行熏蒸消毒30分钟。扩管方法：先将扩管铲在酒精灯火焰上灼烧消毒，然后拔掉母种管上的棉塞，铲一块米粒大的母种，在酒精灯火焰无菌区内迅速送入菌种试管内。扩管后的母种培育10~15天即可投入生产。
