⑴在菇床、菌墙中选择出菇早、无杂菌侵染、株型紧凑、圆整肉厚、色泽美观、七八成熟的第一潮菇的肥壮菇体作种菇；
⑵在种菇中部取最大的3-4张菇片，用70%的酒精轻擦表面后置于接种箱内消毒；
⑶将菇片纵向撕开，在每个裂面靠近菇片边缘处取一米粒大小的菇肉组织接于马铃薯麸皮培养基上。每张菇片共撕10个裂面，接10支试管，一次分离共接30-40支试管；
⑷将试管置于15-30℃下培养；
⑸培养期间每天都要检查发菌情况，从中选择菌丝浓白粗壮、边缘整齐、长速正常、无绿、黄及浆糊状等杂菌斑点的，表现最好的分离种转接于木屑麸皮培养基上，于15-30℃下培养；
⑹菌丝发满后，在接种箱内去掉棉塞，用蜡封口，用黑膜包裹后于4-9℃的冰箱内保藏；
⑺在下一个生产季节与原始保藏种作对比试验，择优作为生产用种。每季都如此复壮，能逐步提高菌种各方面的性状，使发菌加快，抗逆抗杂性增强，质量明显提高。
