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    香菇顺式调控元件的克隆及其序列分析


    【发布日期】:2004-11-09  【来源】:
    【核心提示】:香菇顺式调控元件的克隆及其序列分析CLONINGANDSEQUENCEANALYSISOFCIS-ACTINGELEMENTOFLENTINULAEDODES胡乐琴 姚

    香菇顺式调控元件的克隆及其序列分析

    CLONING AND SEQUENCE ANALYSIS OF CIS-ACTING ELEMENT OF LENTINULA EDODES

    胡乐琴 姚泉洪 陈明杰 熊爱生 潘迎捷 

    摘 要:应用顺式调控元件探测载体G221构建了一个香菇Lentinula edodes基因组文库.G221为大肠杆菌-酿酒酵母穿梭载体,含有一个由酵母Cyc1基因基本启动子控制的lacZ标记基因,能以转录增强活性筛选香菇DNA片段.用这个基因组文库转化酵母菌,获得了一批lacZ阳性转化子.对其中表达较强的阳性转化子进行质粒抽提和双酶切鉴定,筛选到50个香菇顺式调控元件DNA片段.对其中部分片段进行了测序,并对其中一个序列进行了序列分析,鉴别了该序列上的几个与转录相关的特征序列.该研究也探讨了利用酵母表达系统克隆香菇顺式调控元件的可行性.

    关键词:食用菌; 基因组文库; 转录增强活性; LacZ

    分类号:Q939.96  文献标识码:A

    文章编号:1007-3515(2002)03-0406-0411

    基金项目:本研究由上海科技兴农重点攻关项目资金资助

    作者简介:胡乐琴:huyueqin@yahoo.com,通讯作者潘迎捷

    作者单位:胡乐琴(南京农业大学资环学院,南京,210095) 

         姚泉洪(上海农科院生物技术研究中心,上海,201106) 

         陈明杰(上海农科院食用菌研究所,农业部食用菌遗传育种重点开放实验室,上海,201106) 

         熊爱生(上海农科院生物技术研究中心,上海,201106) 

         潘迎捷(上海农科院食用菌研究所,农业部食用菌遗传育种重点开放实验室,上海,201106) 

    参考文献:

    [1]Chen X, Stone M, Schlagnhaufer C et al.,2000. A fruiting body tissue method for efficient Agrobacterium --mediated transformation of Agaricus bisporus. Applied Environ Microbiol, 66: 4510~4513

    [2]Dower SJ, Miller JF, Ragsdale CW,1988. High efficiency transformation of E.coli by high voltage electroporation. Nucleic Acids Research, 16(13): 6127~6145

    [3]Froeliger EH,Ullrich RC,Novotny CP,1989. Sequence analysis of the URA1 gene encoding orotidine-5'-monophosphate decarboxylase of Schizophyllum commune. Gene, 83(2): 387~393

    [4]Gietz D, Jean AS, Woods Ra et al.,1992. Improved method for high efficiency transformation of intact yeast cells. Nucleic Acids Res, 20: 1425

    [5]Hirano T, T.Sato T, Yaegashi K et al., 2000. Efficient transformation of the edible basidiomycete Lentinula edodes with a vector using a glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase promoter to hygromycin B resistance.Mol Gen Genet, 263: 1047~1052

    [6]Jia JH, Buswell JA, Peberdy J,1998. Transformation of the edible fungi ,Pleurotus ostreatus and Volvariella volvacea. Mycol Res,102 (7): 876~880

    [7]Mooibroek H, Kuipers AGJ, Sietsma JH et al.,1990. Introduction of hygromycin B resistance into Schizophyllum commune :Preferential methylation of donor DNA. Mol Gen Genet, 222: 41~48.

    [8]Robzyk K, Kassir Y,1992. A simple and highly efficient procedure for rescuing autonomous plasmids from yeast. Nucl Acids Res, 20: 3790

    [9]Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T, 1989. Molecular Cloning: A Laboratory Manual(2nd Ed ) Cold Spring Harbor, NY : Cold Spring Harbor,Laboratory Press. 1~69

    [10]Santos C, Labarere J, 1999. Aa-Pri2, a single-copy gene from Agrocybe aegerita, specifically expressed during fruiting initiation, encodes a hydrophobin with a leucine-zipper domain. Curr Genet, 35(5): 564~70

    [11]Sato T,Yaegashi K,Ishii S et al., Transformation of the Edible basidiomycete Lentinula edodes by restriction enzyme-mediated integration of plasmid DNA. Biosci Biotechn. Biochem, 62 : 2346~2350

    [12]Sherman F,1991. Getting started with yeast. Methods Enzymol, 194: 3~21

    [13]Zhang YZ, Reddy CA, Rasooly A, 1991. Cloning of several lignin peroxidase (LIP)-encoding genes: sequence analysis of the LIP6 gene from the white-rot basidiomycete, Phanerochaete chrysosporium. Gene, 97(2): 191~198

     
     
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