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    胶陀螺原种菌种标准及生产技术规程


    【发布日期】:2011-01-07  【来源】:易菇网  【作者】:毛玉帮
    1、应用菌种:BI-B7母种。
    2、原种质量标准及检验方法:
    1)外观形态标准:有茂密的灰白色菌丝长满全瓶,在瓶壁边缘有少量的浅黄色菌丝,培养后期有黑色疣状物。无溶菌现象,无杂菌表现,无明显积水,菌种与瓶壁紧贴,菌种柱上部无明显干缩。
    2)镜检:
    ①菌丝无锁状联合;
    ②菌丝着色深、粗壮、分枝多及大量椭圆形胶陀螺孢子,偶见空泡。
    3)内观标准(破瓶检查):具有胶陀螺特有的菇香味,菌种柱具有弹性,上下内外发育一致,用手将半瓶菌种掰成0.513体积大小时不散不碎。
    4)菌种生物学标准:
    ①取菌种柱上、中、下各部位菌种,培养在2%葡萄糖液体培养基中,22±2℃下57d无细菌等生长;
    ②取菌种柱上、中、下各部位菌种,置于常规培养基上培养,22±2℃下7d无各种霉菌生长;
    ③采取②法测定胶陀螺菌种必须在2436h内恢复生长及在4860h内吃料。
    3、原种生产技术规程:
    1)原种必须由母种转接。
    2)原种所用容器为750ml菌种瓶,也可用500ml医用输液瓶。
    3)培养基配制:
    ①配方:小麦粒(或高粱粒)77%、石膏2%、过磷酸钙0.5%、硫酸镁0.2%、磷酸二氢钾0.3%、柞树木屑20%
    ②配制方法:取干净无霉变的小麦(或高粱粒)用清水浸泡12h后,用清水煮到熟而不烂、不开花为原则,捞出沥干水份,加入石膏等其它辅料拌匀,即可装瓶,装瓶要求上紧下松,装至瓶肩处即可。然后用干净抹布擦拭瓶口内外径,使之不粘原料,然后在瓶口处塞上棉花,棉塞上用牛皮纸或双层报纸扎紧。
    4)灭菌:高压灭菌在1.5kg/2下保持2.53h(冷空气全部排除)。
    5)接种:接种必须在超净工作台或接种箱内进行,每支母种接56瓶原种。原种接种也必须严格按无菌操作规程进行。其具体操作如下,双手用75%酒精棉球擦拭,用右手拨去灭过菌的菌瓶棉塞,将瓶固定在瓶架上,并靠近火焰1㎝左右的无菌区,取斜面母种试管,用酒精棉球擦拭管壁,拨出棉塞后在火焰上烧灼管口,接种铲经过火焰灭菌,迅速插入试管内,冷却后取2㎝大小一块母种,送入菌种瓶内,固定在培养基的接种孔中,火燎棉塞后迅速塞好菌种瓶。
    6)培养:原种可在恒温箱中培养,数量大也可在培养室的培养架上培养,最初应竖立放置,待菌种萌发生长,向四周蔓延,菌丝封住培养基后,就应倒架改竖放为横放,横放时要经常转动菌种瓶,可调节瓶内上下水分,有利于菌丝生长。菌种培养条件为22±2℃,但必须注意,随着菌丝生长量的增加,菌丝自身发热程度将逐步增强。另外菌丝繁衍生长过程中进行呼吸作用而产生热量,一般室温与瓶内温度往往相差14℃。因此,室温应控制在比胶陀螺菌最适温度低23℃,即20±2℃为宜。胶陀螺菌属好气性真菌,培养时应注意通风透气,除装瓶时不宜过满,瓶上部留有一定空间有利于该菌生长外,在菌种培养室内也要有适当的通风口或排风扇等机械设备进行通风,以保持培养室内空气清新无异味。由于菌种在固定容器内培养生长菌丝体,所以只要培养基水分适宜,培养室的湿度就很容易调控,一般要保持培养室空气相对湿度为5060%为宜。另外在菌种培养期间,无需光线,以保持黑暗为佳。
    7)原种在22±2℃下2025d满瓶。
        (8)原种满瓶后在515d内用完,否则应放在低温(36)、避光、干燥处保藏。
     
     
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